Courbes étalon POXC

Première dilution

Il est possible de préparer un grand nombre de dilutions (cf. protocole Biofunctools® - 17 dilutions tableau ci dessous).

Table des dilutions pour la courbe étalon (d'après Biofunctools® 2019)

Mais Steve CULMAN (2012a ) propose de réaliser 6 dilutions. A faire par exemple dans des piluliers de 30 ml au moins.

Vol. KMn04 (ml) 0,2M

Vol. eau (ml)

Concentration (M)

1

0.100

9.900

0.002

2

0.250

9.750

0.005

3

0.500

9.500

0.01

4

0.750

9.250

0.015

5

1.00

9

0.02

6

2.00

8

0.04

Seconde dilution

  • Verser environ 40mL d'eau distillée dans des tubes coniques de 50 mL

  • Ajouter 0.50 mL de chaque solution de 10 mL de la première dilution

  • Compléter chaque tube à 50 mL avec de l'eau distillée

  • Verser ces solutions dans des cuvettes de spectrophotomètres

  • Faire le blanc avec une cuvette d'eau distillée

  • Enregistrer l'absorbance de chaque solution à 550 nm

Méthode du Pecnot'Lab

1) Préparer les dilutions suivantes à partir d'une solution de K2MnO4 0.2M

Tube
[K2MnO4]
Volume K2MnO4
Volume H2O

1

0.04M

0.1 ml K2MnO4 0.2M

49.9 ml

2

0.02M

5 ml K2MnO4 0.04M

5 ml

3

0.01M

5 ml K2MnO4 0.02M

5 ml

4

0.005M

5 ml K2MnO4 0.01M

5 ml

5

0.0025M

5 ml K2MnO4 0.005M

5 ml

6

0.00125M

5 ml K2MnO4 0.0025M

5 ml

2) Verser ces solutions dans des cuvettes de spectrophotomètres

3) Faire le blanc avec une cuvette d'eau distillée

4) Enregistrer l'absorbance de chaque solution à 550 nm

5) Déterminer l'équation de la droite étalon y= α + β*Abs où β est la pente de la droite et α l'interception avec l'axe des x (abscisse)

L'équation suivante doit être utilisée pour calculer la concentration de POXC des échantillons cf. le protocole de mesure

Exemple de courbes étalon (comparaison entre 2 appareils)

Déterminer l'équation de la droite étalon y= α + β. Abs où β est la pente de la droite et α l'interception avec l'axe des x (abscisse) (utilisez le tableur pour calculer les caractéristiques de la droite de régression et ses coefficients)

La série de dilutions et le mini spectrophotomètre

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