Courbes étalon POXC
Première dilution
Il est possible de préparer un grand nombre de dilutions (cf. protocole Biofunctools® - 17 dilutions tableau ci dessous).
Mais Steve CULMAN (2012a ) propose de réaliser 6 dilutions. A faire par exemple dans des piluliers de 30 ml au moins.
N°
Vol. KMn04 (ml) 0,2M
Vol. eau (ml)
Concentration (M)
1
0.100
9.900
0.002
2
0.250
9.750
0.005
3
0.500
9.500
0.01
4
0.750
9.250
0.015
5
1.00
9
0.02
6
2.00
8
0.04
Seconde dilution
Verser environ 40mL d'eau distillée dans des tubes coniques de 50 mL
Ajouter 0.50 mL de chaque solution de 10 mL de la première dilution
Compléter chaque tube à 50 mL avec de l'eau distillée
Verser ces solutions dans des cuvettes de spectrophotomètres
Faire le blanc avec une cuvette d'eau distillée
Enregistrer l'absorbance de chaque solution à 550 nm
Méthode du Pecnot'Lab
1) Préparer les dilutions suivantes à partir d'une solution de K2MnO4 0.2M
1
0.04M
0.1 ml K2MnO4 0.2M
49.9 ml
2
0.02M
5 ml K2MnO4 0.04M
5 ml
3
0.01M
5 ml K2MnO4 0.02M
5 ml
4
0.005M
5 ml K2MnO4 0.01M
5 ml
5
0.0025M
5 ml K2MnO4 0.005M
5 ml
6
0.00125M
5 ml K2MnO4 0.0025M
5 ml
2) Verser ces solutions dans des cuvettes de spectrophotomètres
3) Faire le blanc avec une cuvette d'eau distillée
4) Enregistrer l'absorbance de chaque solution à 550 nm
5) Déterminer l'équation de la droite étalon y= α + β*Abs où β est la pente de la droite et α l'interception avec l'axe des x (abscisse)
L'équation suivante doit être utilisée pour calculer la concentration de POXC des échantillons cf. le protocole de mesure
Déterminer l'équation de la droite étalon y= α + β. Abs où β est la pente de la droite et α l'interception avec l'axe des x (abscisse) (utilisez le tableur pour calculer les caractéristiques de la droite de régression et ses coefficients)
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