Courbes étalon POXC

Première dilution

Il est possible de préparer un grand nombre de dilutions (cf. protocole Biofunctools® - 17 dilutions tableau ci dessous).

Table des dilutions pour la courbe étalon (d'après Biofunctools® 2019)

Mais Steve CULMAN (2012a ) propose de réaliser 6 dilutions. A faire par exemple dans des piluliers de 30 ml au moins.

N°	Vol. KMn04 (ml) 0,2M	Vol. eau (ml)	Concentration (M)
1	0.100	9.900	0.002
2	0.250	9.750	0.005
3	0.500	9.500	0.01
4	0.750	9.250	0.015
5	1.00	9	0.02
6	2.00	8	0.04

Seconde dilution

• Verser environ 40mL d'eau distillée dans des tubes coniques de 50 mL

• Ajouter 0.50 mL de chaque solution de 10 mL de la première dilution

• Compléter chaque tube à 50 mL avec de l'eau distillée

• Verser ces solutions dans des cuvettes de spectrophotomètres

• Faire le blanc avec une cuvette d'eau distillée

• Enregistrer l'absorbance de chaque solution à 550 nm

Méthode du Pecnot'Lab

1) Préparer les dilutions suivantes à partir d'une solution de K2MnO4 0.2M

Tube	[K2MnO4]	Volume K2MnO4	Volume H2O
1	0.04M	0.1 ml K2MnO4 0.2M	49.9 ml
2	0.02M	5 ml K2MnO4 0.04M	5 ml
3	0.01M	5 ml K2MnO4 0.02M	5 ml
4	0.005M	5 ml K2MnO4 0.01M	5 ml
5	0.0025M	5 ml K2MnO4 0.005M	5 ml
6	0.00125M	5 ml K2MnO4 0.0025M	5 ml

2) Verser ces solutions dans des cuvettes de spectrophotomètres

3) Faire le blanc avec une cuvette d'eau distillée

4) Enregistrer l'absorbance de chaque solution à 550 nm

5) Déterminer l'équation de la droite étalon y= α + β*Abs où β est la pente de la droite et α l'interception avec l'axe des x (abscisse)

L'équation suivante doit être utilisée pour calculer la concentration de POXC des échantillons cf. le protocole de mesure

Exemple de courbes étalon (comparaison entre 2 appareils)

Déterminer l'équation de la droite étalon y= α + β. Abs où β est la pente de la droite et α l'interception avec l'axe des x (abscisse) (utilisez le tableur pour calculer les caractéristiques de la droite de régression et ses coefficients)

La série de dilutions et le mini spectrophotomètre